9月18日，电影《731》在全球多地上映。据网络平台数据显示，截至当天20时，该片首日票房超过3亿元，总票房（含预售）达到4.03亿元。同日，电影单日场次突破26.9万场，成为中国影史单片单日总场次冠军。根据猫眼专业平台数据，电影《731》打破了内地影史10项纪录，超越了《哪吒之魔童闹海》，成为单片单日总场次和首映日总场次的双料冠军。
该片主要讲述了抗战胜利前夕，侵华日军为了扭转战局，在黑龙江哈尔滨开展细菌战研究，以百姓进行人体实验的暴行。从1937年至1945年，在731部队的直接参与下，日本军国主义在中国多地及东南亚地区建立了细菌战组织体系，留下了人类历史上黑暗的一页。《731》公映时长为125分钟，自9月18日9:00起开始放映。但国内多地影院将首场放映时间定在了当天上午9时18分，并注有“警钟长鸣”的标识。沈阳多家影院也在9月18日9时18分推出了“警钟长鸣”专场，其他时间段还推出了“勿忘国耻”、“吾辈自强”、“守望和平”等专场。沈阳的观众还可以在全国最大的IMAX GT银幕上观看这部电影。
9月17日，影片在哈尔滨举行了全球首映式。首映现场，沉重的画面直击人心，观众在观影过程中不时掩面抹泪。导演赵林山也在现场掩面落泪，他表示：“这个首映必须在哈尔滨，它是一种告慰，对那些逝去的人是一种告慰。”不少网友纷纷表示支持这部电影。